Лабораторные методы исследования

0

Из предшествующих глав можно видеть, что при исследовании повреждений кожи, одежды и орудия, нанесшего травму, целесообразно использовать физико-технические лабораторные методы исследования, позволяющие выявлять новые, дополнительные особенности.

Мы не ставили своей целью подробно описать все лабораторные методы исследования, используемые в диагностике повреждений, наносимых тупыми предметами. Данные о них отражены в некоторых специальных монографиях, руководствах, в практическом пособии, вышедшем под редакцией В. И. Пашковой и В. В. Томилина в 1975 г. Мы обращаем внимание читателя лишь на те методы, которые должны наиболее часто использоваться при экспертизе травмы, на особенности их применения в различных условиях, а также на модификации и усовершенствования отдельных методов для достижения большей эффективности экспертизы травм, наносимых тупыми предметами.

Применение ряда методов исследования (рентгенография, ультразвуковое, гистологическое исследование и др. ) требует особых условий и специальной подготовки. Некоторые предлагаемые нами усовершенствованные методы, используемые для исследования кровоподтеков, обнаружения инородных включений и других особенностей, приведены в соответствующих разделах. На них мы останавливаться не будем. Другая часть методик (стереофотография, непосредственная микроскопия, цветные химические реакции и др. ) доступна каждому судебно-медицинскому эксперту и не требует специальных условий для их проведения. Такие методы исследования повреждений, так же как и самого тупого травмировавшего орудия, должны войти в повседневную экспертную практику. Поэтому мы считаем целесообразным привести описание только некоторых из них, позволяющих выявлять те или иные особенности при исследовании разбираемых объектов. Однако следует обратить внимание на то, что кожа трупов в судебно-медицинской практике может стать объектом исследования через длительные промежутки времени после наступления смерти и развития различных трупных явлений (гнилостные процессы и высыхание, разрушающие или изменяющие первоначальный вид повреждения). Визуальное исследование и применение лабораторных методов в этих случаях часто не приводят к желаемому результату, поэтому, прежде чем приступить к исследованию повреждений на таких тканях, нужно восстановить первоначальную картину повреждения. В настоящее время в судебно-медицинской практике широко распространен метод, предложенный А. Н. Ратневским (1968), который положен в основу методических указаний главного судебно-медицинского эксперта (1972). С этого метода целесообразно начать описание методик, применяемых при судебно-медицинских исследованиях повреждений, наносимых тупыми предметами.

Восстановление первоначальной формы кожных ран с помощью уксусно-спиртовых растворов. Область повреждения следует иссекать таким образом, чтобы ширина участка неповрежденной кожи вокруг него была не менее 1—1, 5 см. Подкожный жировой слой удаляют, затем кожный лоскут высушивают при комнатной температуре, а при гниении — с помощью вентиляторов. Применение для ускорения высыхания высокой температуры не рекомендуется, так как это вызывает денатурацию белков, в результате чего не происходит набухания коллагеновых волокон. Высушивание продолжается до 2 сут, затем лоскут обезжиривают в этиловом эфире, сменяя его трижды через каждые 4—6 ч. В таком виде лоскут кожи может храниться длительно.

После высушивания препарат помещают на 3 — 4 сут в раствор № 1 (ледяная уксусная кислота—10 мл, спирт этиловый — 20 мл, дистиллированная вода — 100 мл). Затем препарат извлекают, удаляют излишки раствора фильтровальной бумаги, подсушивают при комнатной температуре в течение 2—3 ч. Кожа приобретает прежний вид. В растворе № 1 восстановленный кожный лоскут может храниться длительно. Для восстановления кожных ран при резко выраженных гниениях с целью обесцвечивания препарата в раствор № 1 добавляют пергидроль в количестве 10—2 0 мл на 100 мл раствора (раствор № 2). Чем темнее окраска кожи, тем большее количество пергидроля следует добавлять в раствор. Обесцвечивание препарата длится до 7—12 сут. Храниться препарат может в растворе № 1.

Несмотря на хорошие результаты, получаемые при применении этого способа, следует отметить, что размеры ран на восстановленных препаратах уменьшаются на 1 0 — 1 6 % первоначальной величины, поверхностные осаднения, наложения на поверхности кожи и отделившиеся с эпидермисом при гниении не выявляются.

После восстановления целесообразно проводить лабораторные методы исследования, вплоть до гистологического.

Стереофотография. Мы остановимся лишь на некоторых видах стереофотографии, разработанных нами, ибо различные виды фотографических приемов, используемых в судебной медицине, изложены в пособии X. М. Тахо-Годи (1965).

Стереофотосъемка может быть выполнена как специальной стереофотокамерой, так и при помощи стереофотонасадок. Стереофотографии можно получить также двумя однотипными зеркальными камерами. Однако все эти способы для судебно-медицинских исследований повреждений не пригодны, так как позволяют получать снимки только с дальней дистанции, уменьшающие объект в несколько раз. Нам же необходимо получать фотографии повреждений либо в натуральную величину, либо несколько увеличенных. Для получения таких снимков лучше всего использовать фотокамеру типа: «Фотокор» с двойным растяжением меха (например, выпускаемую Харьковской фотофабрикой камеру «ФК 13X18»). Двойное растяжение меха позволяет получать фотографии объекта в натуральную величину. Если же заменить объектив «Индустар-51» с фокусным расстоянием 21 см на объектив «Индустар-23» с фокусным расстоянием 11 см, масштаб съемки можно увеличить.

Замену объектива можно осуществить как с помощью специально изготовленного переходного кольца, так и путем замены объективной доски с основным объективом на деревянную планку с отверстием (приданную к фотоаппарату), в котором укрепляют соответствующий сменный объектив. Объект исследования помещают на горизонтально расположенную, укрепленную неподвижно на столе планку, которую (как в пенале или кассете) двигают в пазах и перемещают так, чтобы нужное изображение заняло половину матового стекла фотоаппарата размером 9X12 см с нанесенными на нем карандашными отметками. Другую половину матового стекла прикрывают картонным вкладышем, закрывающим в момент съемки нерабочую часть фотопластинки. Путем перемещения объекта изображение одной из выделяющихся точек подводят к отметке матового стекла и производят наводку на резкость. Матовое стекло после этого, как обычно, заменяют заряженной кассетой и производят съемку при большом диафрагмировании. Экспозицию отрабатывают опытным путем. После съемки объект передвигают к другой половине матового стекла так, чтобы к такой же отметке была подведена та же точка снимаемой части предмета. Затем прикрывают картонным вкладышем другую, уже использованную половину фотопластинки и вновь при той же экспозиции производят съемку. После получения позитивных снимков составляют стереопару. При необходимости получить стереофотографии с ложным эффектом нужно левое изображение стереопары поместить на место правого или наоборот. Общий размер снимка— 9X12 см соответственно выпускаемым стереоскопам, каждый снимок стереопары имеет размер 6X9 см.

Можно использовать и другой способ стереосъемки, когда движется не объект, а укрепленная в пазах длиной 8 см фотокамера. Делают это с помощью пластинки, прикрепленной к стационарному стенному штативу, позволяющему перемещать фотоаппарат по вертикали. В этом случае объект устанавливают неподвижно на весь период съемки.

Для получения стереомикрофотографии можно пользоваться специально выпускаемой к стереомикроскопу МБС-2 стереофотонасадкой МФН-5. При ее отсутствии применяют обычную плоскостную микрофотонасадку МФН-1, которую с помощью специального кольца укрепляют на один из тубусов стереомикроскопа. На предметном столике стереомикроскопа в имеющихся в нем отверстиях неподвижно, параллельно длиннику фотокамеры, укрепляют препарато водитель. Обьект (например, кожный лоскут), помещенный на стеклянную пластинку, передвигают винтом препаратоводителя по одной линии. Наблюдение ведут через окуляр микрофотонасадки. Препарат устанавливают так, чтобы избранная для исследования часть его заняла бы вначале одну, а затем другую половину видимого прямоугольника, который вместе с четырьмя парными штрихами, служащими для наводки на резкость, и является ориентиром при установке объекта. Вкладыш в виде засвеченной рентгеновской пленки устанавливают на края фотокамеры, а поверх него устанавливают кассету. После экспозиции кассету закрывают, приподнимают, вкладыш перемещают на вторую половину и вновь производят съемки. Необходимо следить, чтобы освещение и экспозиция в обоих случаях были одинаковыми. Стереопары готовят, как обычно. Получаемые таким способом стереомикрофотографии достаточно качественны и не уступают полученным на специальных стереофотонасадках.

Непосредственная стереомикроскопия. Одним из широко доступных методов является простой и вместе с тем достаточно эффективный метод непосредственной стереомикроскопии. Он может быть использован в амбулаторных условиях при исследовании повреждений на живых лицах, на трупах людей, при исследовании вещественных доказательств (одежда, орудия травмы).

В судебно-медицинских целях микроскопия кожного лоскута без специальной обработки впервые была применена при исследовании огнестрельной раны Л. М. Эйдлиным (1953), который назвал метод непосредственной микроскопией.

Исследование повреждения начинают с визуального осмотра и описания выявленных при этом особенностей. Целесообразно производить фотографирование с помощью фотоаппарата с зеркальной наводкой, например типа «Зенит», с использованием переходных колец. Затем кожный лоскут, наложенный на стеклянную пластинку, помещают на столик стереомикроскопа МБС-2 и изучают при увеличении от Х12. 5 до Х50. Для профильного изучения повреждений кожный лоскут натягивают на картон и исследуют либо сразу, либо после фиксации в формалине. Кожный лоскут на картоне устанавливают на месте столика стереомикроскопа и удерживают двумя зажимами штатива Бунзена в вертикальном положении так, чтобы оптическая ось стереомикроскопа проходила вдоль плоскости кожи поперечно длиннику повреждения. Для микроскопии предполагаемого орудия травмы его также укрепляют зажимами штатива Бунзена, что позволяет легко перемещать орудие при осмотре и микрофотографировании. При большой величине исследуемого предмета стереомикроскоп извлекают из штатива и удерживают в руках. При отсутствии стереомикроскопа можно использовать самые малые увеличения биологического микроскопа, хотя он имеет ограниченное применение: им невозможно проводить исследования повреждений на живых людях, непосредственно на трупе или при изучении предполагаемого орудия больших размеров; он имеет небольшое поле зрения и не обладает стереоэффектом.

При обнаружении новых деталей повреждения производят их микрофотографирование с помощью микрофотонасадки МФН-1 (или другой) или фотоаппарата «Зенит», которые вставляются в один из тубусов стереомикроскопа с помощью специально изготовляемых переходных колес. Для непосредственного микроскопирования на трупе удобно применять операционный микроскоп с фотонасадкой, при ее отсутствии на один из тубусов с помощью специально изготовленного кольца можно вставить фотоаппарат «Зенит» для микрофотографирования. Делать это, хотя и менее удобно, необходимо в случаях, когда невозможно взять с трупа лоскут кожи с повреждением (например, при повреждении лица).

При непосредственной микроскопии, проводимой сразу после нанесения повреждений, когда нередко еще не выявляются четко различимые детали, для повышения контрастности целесообразно окрашивать поверхность кожи 0, 25% раствором метиленового синего. Раствор наливают на 1—2 мин на область повреждения, затем смывают водой, лоскут высушивают и изучают область травмы. Места, лишенные эпидермиса, окрашивают, что повышает контрастность под микроскопом картины повреждения. В случаях незначительного подсыхания кожи, которое затрагивает и область повреждения, маскируя детали, на поверхность кожи накладывают смоченную в воде марлевую салфетку и через 2—3 ч проводят исследование. При сильно выраженных процессах высыхания целесообразно применять раствор Ратневского.

Проводить непосредственную микроскопию при освидетельствовании живых лиц целесообразно с помощью стереомикроскопа. Иногда стереомикроскопом пользуются, сняв его со штатива и удерживая в руках. Из выпускаемых нашей промышленностью приборов наиболее удобными для непосредственной микроскопии при экспертизе живых лиц являются операционный микроскоп и люминесцентный фотодиагноскоп.

Микрофотографирование повреждений у живых лиц связано с рядом трудностей и прежде всего с отсутствием фотоприставок, поэтому целесообразно с помощью соединительных колец на один из тубусов стереомикроскопа или операционного микроскопа вставлять фотоприставку МФН-1 или фотоаппарат «Зенит». После выбора места съемки, наводки на резкость, освещения фотографируемого участка импульсной лампой съемку производят одновременно со вспышкой и открытием затвора аппарата.

В ряде случаев, например при исследовании ссадин и царапин у живых лиц, микроскопическое исследование можно проводить путем изготовления отпечатка на целлоидиновой пленке, сохраняемой в 7 0% спирте. Одну из сторон ее увлажняют ацетоном, накладывают на исследуемый участок в течение 10—15 с и прижимают пальцем. Однако этот способ имеет ограниченное применение: он не может быть использован на поверхности, покрытой волосами, при глубоких повреждениях с нарушением целостности костей; получению качественного отпечатка мешает вытекающая из раны кровь.

Для того чтобы создать большие удобства при использовании метода непосредственной микроскопии при освидетельствовании живых лиц и одновременно пользоваться другими дополнительными методами исследования, нами применяются два комплекта приборов. Первый можно собрать на базе операционного микроскопа Ленинградского завода «Красногвардеец», на окулярную трубку которого с помощью переходного кольца прикрепляют фотоаппарат «Зенит». При необходимости получить стереомикрофотографию в штатив операционного микроскопа вставляется стереомикроскоп МБС-2 со стереомикрофотонасадкой МНФ-5. Учитывая, что для получения микрофотографии при освидетельствовании живых людей необходима крайне короткая экспозиция, а освещение микроскопа слабое, используют освещение импульсной лампой-вспышкой.

Для выявления повреждений костей используют портативную рентгеновскую дентальную трубку, кожух которой на шарнирном плече прикреплен с помощью подвижной втулки к штативу операционного микроскопа.

Еще более удобным для использования в амбулаторных условиях является комплект, который можно собрать на базе зубоврачебного кресла КЗ-2; он позволяет придавать освидетельствуемому любого возраста положение, удобное для осмотра и исследования. Сидению при необходимости можно придавать наклонное положение, отклонив его от горизонтали на 15°. Осуществляя наклон спинки от вертикального до горизонтального положения, освидетельствуемому можно придавать полулежачее или лежачее положение, что необходимо, например, при осмотре половых органов. Возможность отклонить спинку кресла позволяет беспрепятственно осматривать область спины обследуемого, находящегося в кресле. Для удержания головы освидетельствуемого служит подголовник, легко устанавливаемый благодаря шарниру в различных положениях и на разной высоте, а для фиксации тела — полумягкая спинка, которая дополнительно перемещается по высоте и отклоняется при откидывании рычага.

Для проведения непосредственной микроскопии к креслу прикрепляют операционный микроскоп. С этой целью в вертикальную полую трубку штатива рентгеновского аппарата вставляют стойку с муфтой и горизонтальной штангой операционного микроскопа, которую легко извлекают из его основной полой стойки и закрепляют винтом на новом месте. В связи с тем что бинокулярная головка в операционном микроскопе укреплена таким образом, что позволяет осматривать объект только сверху и не устанавливается в горизонтальном положении, в ее конструкцию следует внести некоторые изменения. В раздвоенной втулке шарового шарнира прикрепляют дополнительную цилиндрическую пластинку, соединенную с маховиком. В этом случае возможны перемещение оптической головки вдоль оси, наклон и поворот головки, перемещение ее в горизонтальном и вертикальном положении. Если к тому же учесть, что рабочее расстояние бинокулярной головки от передней поверхности объектива до плоскости предмета находится в пределах 22—24 см, то станет ясной доступность для исследователя повреждения в любой области тела.

Для получения микрофотографии на один из тубусов бинокулярной головки с помощью специального переходного кольца прикрепляют зеркальную фотоаппаратуру, например марки «Зенит», с импульсной лампой. После выбора места увеличения, что достигается путем замены окуляров и фокусирования, производят фотосъемку при экспозиции 7зо с.

Достоинство кресла состоит в том, что, помимо непосредственной микроскопии, оно позволяет использовать и другие методы исследования при освидетельствовании пострадавшего. Для получения рентгенограмм костей лицевого черепа (нос, челюсти, зубы) к креслу прикреплена подвижная дентальная рентгеновская трубка. К вертикальной стойке левого подлокотника крепится отходящий кверху под прямым углом штатив, удерживающий съемный столик, подвижный в горизонтальной плоскости. На нем удобно располагать реактивы и нужный инструментарий.

Для того чтобы к сидящему в кресле свидетельствуемому было удобнее подойти, мы убрали подножку. Это также дало возможность подкатывать к креслу на близкое расстояние люминесцентный фотодиагноскоп, удобный для проведения исследования повреждений в области половых органов.

Исследования в ультрафиолетовых и инфракрасных лучах. Люминесцентный анализ может быть использован для установления наличия или ориентировочного определения природы загрязнений и инородных включений вокруг повреждения и в глубине его как на поверхности кожи или одежды, так и на орудиях травмы. Для этих целей могут быть использованы различные источники ультрафиолетовых лучей, в частности, ртутно-кварцевые лампы, а также источники синего света. При осмотре и фотографировании контрастность светящегося объекта усиливают желтые светофильтры ЖС-12, оранжевые ОС-12 и др. Для защиты от ультрафиолетовых лучей применяют желтые светофильтры ЖС-4, бесцветные БС-8 и др.

Фотографировать люминесценцию можно обычными фотоаппаратами на несенсибилизированных фотоматериалах, а также на фототехнических пленках, диапозитивных пластинках и др.

Отечественная промышленность выпускает микроскоп для исследования в ультрафиолетовых лучах МУФ-6, инфракрасный исследовательский микроскоп МИК. -1, микроскоп с фотонасадками. При их отсутствии, особенно в условиях работы районного эксперта, можно использовать предложенные нами приспособления для макро- и микроскопического исследования в ультрафиолетовых и инфракрасных лучах и фотографирования. С этой целью применяют более распространенные в судебно-медицинской практике приборы, такие, как стереомикроскоп, люминесцентная лампа, электронно-оптический преобразователь.

На стойке стереомикроскопа МБС-2 крепится с помощью двух зажимов Бунзена осветитель для люминесцентной диагностики ОЛР-П. На объектив стереомикроскопа надевают насадку для светофильтра, которая имеет пазы, позволяющие укрепить ее на выступы объектива. Насадка квадратной формы, размером 6x6 см, изготовлена из органического стекла толщиной 1, 4 см, в центре имеется углубление 4X4 см для светофильтра с круглым отверстием диаметром 3, 6 см. Обычно используют желтый (ЖС-12) или оранжевый ОС-12 светофильтр.

После люминесцентного исследования и выбора необходимого места производят микрофотографирование. Для этого с помощью переходного кольца на один из тубусов стереомикроскопа надевают микрофотонасадку. Используют флюорографическую пленку чувствительностью 800 Р. Съемку производят при открытой диафрагме. Экспозиция варьирует в зависимости от цвета и степени люминесценции, расстояние от объекта при макросъемке от 4 с до 1 мин, при микрофотографировании от 5—6 до 15—17 мин.

Не менее эффективным для выявления некоторых загрязнений в зоне травмы является использование инфракрасных лучей с помощью электронно-оптического преобразователя (ЭОП). Наиболее распространенным и доступным электронно-оптическим преобразователем, используемым в следственной и экспертной практике, является портативный прибор С-330. Однако, как и другие ЭОП, он обладает большим недостатком: с его помощью невозможно документировать выявленные изменения. Этот пробел мы восполнили приспособлением, которое позволяет проводить как визуальное исследование, так и непосредственную микроскопию и получать микрофотографии.

Для получения фотографии электронно-оптический преобразователь соединяют с зеркальным фотоаппаратом, например марки «Зенит», с помощью соединительной планки так, чтобы их оптические оси совпадали. К просверленным отверстиям соединительной планки, представляющей собой дюралюминиевый угольник размером 2X2x2 0 см, крепятся фотоаппарат и ЭОП. К средней части планки под углом 30° прикреплен угольник размером 2X2X8 см с двумя отверстиями для соединения со штангой операционного микроскопа, которая с помощью муфты крепится к стойке стереомикроскопа или к стойке, изготовленной специально для нее. Перемещение ЭОП с фотоаппаратом по высоте производится путем вертикального движения муфты. Перемещение вдоль оптической оси осуществляется с помощью маховичка, наклон обеспечивается шаровым шарниром.

Для исследования загрязнений на изучаемом объекте при непосредственной микроскопии целесообразно использовать стереомикроскоп МБС-2, к одному из окуляров которого с помощью описанных выше приспособлений подводят электронно-оптический преобразователь. Это дает возможность проводить визуальное стереомикроскопическое исследование. После выбора нужного места для съемки к смотровому окошечку ЭОП подводят объектив фотоаппарата «Зенит», который после этого фиксируют винтом к соединительной планке. При этом необходимо наводить фотоаппарат на резкость. Фотографирование производят с помощью переходных колец с использованием флюорографической пленки РФ-3 чувствительностью 800 Р при открытой диафрагме. Экспозиция при макрофотографировании — в пределах 7зо с, при микрофотографировании в зависимости от увеличения — 2—5 с.

Широкая доступность метода непосредственной микроскопии при исследовании механических повреждений на различных объектах и вещественных доказательств с использованием ультрафиолетовых и инфракрасных лучей, быстрота и легкость выявления ряда признаков, расширяющих возможности экспертных суждений об особенности орудия и механизме его действия, а также полное сохранение объекта изучения для других исследований позволяют использовать его в повседневной экспертной практике в комплексе с другими лабораторными методами исследования.

Метод цветных отпечатков. Из многочисленных методов выявления металла наиболее приемлемыми и универсальными являются методы цветных отпечатков, и прежде всего контактно-диффузионный, позволяющий установить природу металла и топографическую картину его отложения.

Для его выполнения заранее готовят реактивы-растворители и реактивы-проявители. К первым относятся:

аммиак — 12% раствор;

кислота уксусная—25% и 10% растворы;

буферная смесь рН 2, 8 (для этого берут 1, 5 г винной кислоты и 1, 9 г битартрата на 100 мл воды); кислота азотная — 1 % раствор.

Реактивы-растворители могут храниться в закрытой посуде длительное время.

Реактивы-проявители:

рубеановодородная кислота — насыщенный спиртовой раствор (лучше на метиловом спирте); реактив может храниться в течение длительного времени;

родизонат натрия или калия — 0, 2% водный раствор, готовится перед употреблением;

альфа-нитрозо-бета-нафтол. Реактив готовится следующим образом: 1 г альфа-нитрозо-бета-нафтола в присутствии 1 мл 2 н. раствора едкого натра растворяют при нагревании в 20 мл дистиллированной воды, фильтруют и разбавляют дистиллированной водой до 200 мл (готовится перед употреблением);

калия ферроцианид (желтая кровяная соль)—0, 05% раствор в 10% растворе соляной кислоты; калия йодид — 5% раствор;

натрия сульфид — 2 5 % раствор (готовится перед употреблением, так как через несколько часов разлагается);

морин—насыщенный раствор в метиловом спирте.

Затем в обычном фиксаже, налитом в пластмассовую кювету, в течение 30 мин фиксируют фотобумагу, промывают ее в дистиллированной воде, несколько раз меняя последнюю, и высушивают, разложив на чистой бумаге.

На коже или текстильной ткани, взятой на исследование, находят границы поражения и отмечают их так, чтобы отметка находилась в неповрежденной зоне на расстоянии 2 см от них. На тыльной стороне листка фотобумаги делают неострым карандашом необходимые записи и на 5 мин помещают его в кювету с реактивом-растворителем. Пропитанную реактивом-растворителем фотобумагу промокают фильтровальной бумагой и накладывают на исследуемую поверхность. При надавливании на нее не следует допускать перемещения бумаги по поверхности, так как контуры отпечатка будут смазаны. Целесообразно проводить контрольное исследование предмета-носителя в ближайшей от участка исследования области.

Для того чтобы устранить неровности, имеющиеся на исследуемом участке, на фотобумагу сверху, соответственно местам западений, накладывают ватные тампоны, зажимают ее между двумя твердыми плоскостями и помещают под пресс. Через 5—10 мин бумагу извлекают из-под пресса или груза и обрабатывают реактивом-проявителем, поместив ее эмульсией кверху в кювету или на стекло и нанося пипеткой реактив-проявитель на нее непосредственно или через фильтровальную бумагу. Появление на фотобумаге цветного окрашивания свидетельствует о наличии металла на объекте исследования.

После обработки реактивом-проявителем отпечаток в течение нескольких минут промывают в проточной воде и сушат. Родизонат свинца при промывании, глянцевании и хранении отпечатка довольно быстро обесцвечивается. Поэтому после обработки отпечатка родизонатом натрия и появления окрашивания, свидетельствующего о наличии свинца, отпечаток, не промывая, можно повторно обработать раствором сернистого натрия, при этом красно-фиолетовое окрашивание переходит в темно-коричневое и черно-коричневое. Потом отпечаток промывают в проточной воде и глянцуют, как обычную фотографию.

Получению хорошего отпечатка с повреждения, находящегося на трупе, препятствуют неровности подлежащих тканей, выделение из раны крови, особенно при надавливании на рану. Поэтому, как правило, исследовать нужно кожные лоскуты после отделения их от 8рупа и освобождения от подкожного жирового слоя.

В случае невозможности изъять кожный лоскут (лицо, голова, шея) рекомендуется проводить исследование непосредственно на трупе следующим образом: по обе стороны раны, отступя на 4—5 см, делают Два параллельных дополнительных разреза кожи длиной 5—6 см. глубиной до подкожного жирового слоя. Кожу между разрезами отделяют от подкожной клетчатки ампутационным ножом. В отверстие вставляют пластмассовую пластинку с таким расчетом, чтобы ее концы выступали из дополнительных разрезов на 1—2 см. Затем под кожу в области раны пинцетом подводят ватный шарик, область повреждения покрывают листом пропитанной реактивом-растворителем фотобумаги и второй пластмассовой пластинкой. Концы обеих пластинок зажимают струбцинками на 10 мин, после чего бумагу извлекают и обрабатывают реактивом-проявителем.

Разновидностью метода цветных отпечатков является электрографическое исследование. Экспертная практика показала, что этот метод менее удобен, чем метод цветных отпечатков, он связан с необходимостью иметь специальное оборудование. Электрографический метод не имеет преимуществ перед контактно-диффузионным, поэтому применение его ограничено.

Контактно-диффузионный метод выявления металлов при всей кажущейся простоте требует лабораторной обстановки и реактивов, которые могут отсутствовать. Его нельзя применить при осмотре места происшествия, когда возникает необходимость установить, не является ли то или иное повреждение стен, пола или предметов обстановки огнестрельным. Трудности могут также возникнуть при исследовании трупа, находящегося вне морга. В этих условиях удобно использовать экспресс-метод с тест-бумагой на свинец и медь (Л. М. Эйдлин, 1965). Для определения свинца тест-бумагу готовят, пропитывая фильтровальную бумагу раствором 2% калия йодида, а затем просушивают. Для установления меди отфиксированную бумагу помещают на сутки в смесь равных объемов дистиллированной воды и глицерина, затем просушивают ее, помещая между несколькими слоями фильтровальной бумаги, и окрашивают насыщенным раствором рубеано-водородной кислоты в ацетоне.

Тест-бумагу можно заранее готовить в лаборатории и рассылать на места. Если имеется тест-бумага, требуется только один реактив: глицерин и дистиллированная вода — по 15 мл и уксусная кислота — 5 мл. Этот реактив наносят стеклянной палочкой или кисточкой на край исследуемых повреждений, к которым через 1—2 мин прижимают на 7 г или 1 мин пальцем или ладонью тест-бумагу. При наличии свинца на бумаге получают соответствующие площади его отложения желтое пятно, а на бумаге, предназначенной для определения меди, при наличии ее — зеленоватое пятно.

С помощью тест-бумаги могут быть исследованы раны на трупах. Для этого делают отступя от края раны на 1—2 см разрез кожи, в него вставляют пластмассовую пластинку-линейку, которую подводят под отсепарованную кожную рану. Рану осушивают марлей, края ее смачивают раствором глицерин — дистиллированная вода — уксусная кислота, накладывают тест-бумагу на рану и прижимают к ней на 1—2 мин пальцем или ладонью.

Цветные химические реакции. Цветные химические реакции для обнаружения металлов в области повреждения используют как при изучении макроскопических объектов, так и при гистологическом исследовании. Т. Е. Татаринова и В. И. Капелько (1958) показали возможность проведения реакции Тирманна непосредственно на ссадинах. А. П. Загрядская (1968) применяла для определения в текстильных тканях и повреждениях кожи солей окиси железа, помимо реакции Тирманна, реакцию Перльса.

Реакция Перльса для определения солей окиси железа. На область повреждения наносят свежеприготовленную смесь равных частей 2% раствора желтой кровяной соли и 2% соляной кислоты, которую через 7—10 мин смывают дистиллированной водой. При наличии солей железа поверхность окрашивается в сине-зеленоватый цвет (берлинская лазурь). Вместо желтой кровяной соли можно использовать 10% раствор роданистого калия, который при наличии трехвалентного железа вызывет ярко-красное окрашивание.

Реакция Тирманна для определения солей окиси и закиси железа. На область повреждения накладывают марлевую салфетку, пропитанную насыщенным раствором сернистого аммония, который постоянно добавляют в течение 2 ч (если есть возможность изъять лоскут кожи или текстильной ткани, его помещают на 2 ч в насыщенный раствор сернистого аммония). Затем сернистый аммоний смывают дистиллированной водой, смачивают область повреждения свежеприготовленной смесью равных частей 2 0 % раствора красной кровяной соли и 1% соляной кислоты и через 7—10 мин снова промывают дистиллированной водой. При наличии солей железа исследуемая область окрашивается в синий цвет (образование турнбулевого синего).

Если область повреждения покрыта кровью, то предварительно ее удаляют, осторожно смачивая несколькими порциями дистиллированной воды. Жировая пленка, выступающая на поверхности повреждения, препятствует контакту реактива со следами железа, поэтому ее необходимо предварительно удалить. С этой целью А. Л. Федоровцева и Н. С. Эделев (1973) предложили модификацию приведенных методов, которая заключается в следующем:

1. Жировую пленку, препятствующую контакту реактива с основной массой ржавчины, удаляют с поверхности изучаемого объекта ацетоном или эфиром. Кость обезжиривают в течение 2 0—3 0 мин, кожу — не менее 2 4 ч.

2. Отфиксированную фотобумагу в течение 1—2 мин пропитывают свежеприготовленным реактивом, состоящим из 2 — 4% раствора желтой кровяной соли и 2 5% серной кислоты, взятых в соотношении 1: 2.

3. Пропитанную реактивом фотобумагу плотно прижимают к обезжиренному объекту на 2—3 мин. При положительном результате на бумаге остаются четкие отпечатки сине-зеленого цвета (берлинская лазурь).

Результаты цветных химических реакций можно наблюдать визуально. Однако наиболее отчетливо они видны при рассмотрении объекта под стереомикроскопом при небольших увеличениях.

Цветные химические реакции на наличие меди и свинца не получили распространения.

Метод хроматографии на бумаге. При гниении трупа, обширных кровоизлияниях в подкожную жировую клетчатку, пропитывании кровью одежды применение контактно-диффузионного метода затруднительно. В таких случаях может быть применен метод выявления металлов на хроматографической бумаге, разработанный И. Я. Куповым (1967) и изложенный в методических указаниях главного судебно-медицинского эксперта (1972). Использование этого метода наиболее эффективно при экспертизе огнестрельных повреждении. Наши исследования показали возможность применения его и при экспертизе тупой травмы.

Реактивы:

2 5% раствор уксусной кислоты (рэактив-растюргаель);

смесь равных объемов насыщенного раствора рубеановодородной кислоты в этиловом спирте и насыщенного водного раствора родизоната натрия (калия) (реактив-проявитель);

буферная смесь рН 2, 8 (1, 5 г винной кислоты и 1, 9 г натрия кислого виннокислого растворяют в 100 мг дистиллированной воды). Смесь раствора родизоната натрия с насыщенным спиртовым раствором рубеановодородной кислоты готовится непосредственно перед проявлением.

Ножницами вырезают лист хроматографической бумаги длиной 2 0—2 5 см. Ширина его при использовании чашки Петри может превосходить ее диаметр, однако в таких случаях нижний конец листа нужно срезать на конус с таким расчетом, чтобы он был немного меньше диаметра чашки. Предварительной обработки хроматографической бумаги не требуется. На расстоянии 5—6 см от конусообразно суженного конца на листе хроматографической бумаги мягким графитным (простым) карандашом при слабом нажиме проводят горизонтальную линию — линия старта. На ней таким же карандашом размечают места, на которые будут нанесены исследуемый и контрольный материалы. Для этого на расстоянии 2, 5—3 см от бокового края листа ставят первую точку. Далее на таком же расстоянии одну от другой наносят остальные точки. По обе стороны от каждой из них, на расстоянии 0, 5 см друг от друга, делают вертикальные разрезы длиной также 0, 5 см.

Заранее готовят полоски хроматографической бумаги длиной примерно 4 см, шириной в средней части 0, 5 см, с суженными концами. Эти полоски пропускают концами в прорези на листе, в каждую пару разрезов, так чтобы между листом и полоской образовался прикрытый квадрат 0, 5X0, 5 см — гнездо. Далее в каждое гнездо, заключенное между полоской и листом, при помощи острого конца ножа помещают объект исследования размером 0, 3—0, 4X0, 2—0, 3 см либо соскоб с него, либо вырезанный из области повреждения кусочек одежды.

Материал необходимо помещать на лист хроматографической бумаги той стороной (поверхностью), на которой глазом видны повреждения. Это важно для получения правильного результата.

После того как кусочек материала поместили на бумаге, концы соответствующей полоски на обратной стороне листа протягивают в противоположные стороны. Для лучшего контакта с хроматографической бумагой, помещенной в гнездо, объект следует слегка придавить сверху и как бы притереть скользящими движениями гладкой пластмассовой рукоятки ножа. В последнее гнездо помещают материал для контроля — кусочек кожи или соскоб с нее или ткань одежды, взятые в стороне от повреждения. Фиксируют его так же, как и исследуемые кусочки. После этого лист хроматографической бумаги отгибают на расстоянии 1—1, 5 см от края, близлежащего к линии старта, и отогнутую часть помещают на дно чашки Петри и фиксируют. Другой конец листа фиксируют в перекладине штатива. На дно сосуда наливают растворитель — 2 5 % раствор уксусной кислоты, уровень которого в чашке должен быть не менее 1 см.

Штатив, хроматографическую бумагу и сосуд с растворителем накрывают стеклянным колпаком, стеклянной банкой или полиэтиленовым мешком.

Растворитель начинает распространяться по бумаге вверх до линии старта и далее. При соприкосновении растворителя с медью или свинцом образуются соли. Последние с растворителем, но несколько медленнее его, продвигаются вверх. Когда фронт поднимется выше линии старта на 7—10 см, пропускание растворителя можно прекратить.

Время пропускания растворителя зависит от сорта хроматографической бумаги и температуры в помещении. При повышении температуры воздуха скорость движения растворителя по листу возрастает. Пропускание растворителя через лист хроматографической бумаги марки «М» Ленинградской фабрики им. Володарского при комнатной температуре длится обычно 40 мин — 1 час.

Для проявления полос свинца и меди лист хроматографической бумаги извлекают из растворителя и, после того как он высохнет, из стеклянного пульверизатора орошают смесью 1: 1 насыщенного спиртового раствора рубеано-водородной кислоты и насыщенного водного раствора родизоната натрия (калия). Под воздействием проявителя при наличии на объекте свинца на листе хроматографической бумаги образуется нестойкая розовая или красная полоса, при наличии меди — стойкая темно-зеленая или зеленая.

После высушивания хроматографической бумаги можно обвести границы полос металлов карандашом и сделать пометку о наличии в них свинца или меди.

Следует отметить, что хроматографическое выявление металла несколько сложнее и длительнее по времени, чем контактно-диффузионный метод, оно не позволяет определять форму и размеры зоны соударения тупого орудия с объектом. Поэтому применять его стоит только в случаях, когда невозможно использовать метод цветных отпечатков.

Методы исследования наложений клеток животных тканей и текстильных волокон одежды на предполагаемом орудии травмы. Доставленное орудие осторожно извлекают из упаковки, внутреннюю поверхность которой внимательно осматривают на наличие каких-либо загрязнений. Орудие после визуального осмотра подвергают стереомикроскопии. Выявленные на нем наложения в виде засохших корочек под стереомикроскопом извлекают с поверхности. Для этих целей удобно использовать препаровальную иглу или заостренный конец скальпеля, смоченные в дистиллированной воде. Частицы переносят на обезжиренное предметное стекло и размачивают в капле 5% уксусной кислоты в течение 2—24 ч в зависимости от степени высыхания наложений. Во избежание испарения предметное стекло помещают во влажную камеру, используя для этого чашку Петри, на дне которой находится вата, смоченная водой. Разбухшие частицы сдавливают между двумя предметными стеклами и готовят мазки, раздвигая стекла в противоположные стороны. При достаточном количестве наложений готовят несколько мазков. Фиксируют их метиловым спиртом в течение 15 мин, окрашивают гематоксилин-эозином либо другим красителем. При обнаружении достаточных по величине кусочков делают срезы на микротоме и готовят обычным способом гистологический препарат. Однако на тупом предмете в отличие от острого орудия такие кусочки почти не встречаются. Иногда делают смывы-соскобы, нанося на избранный участок орудия 0, 85% стерильный раствор натрия хлорида. При исследовании орудия до поступления его в биологическое отделение нужно быть очень осторожным, чтобы не уничтожить следы крови.

Поскольку наложения на тупом орудии обычно незначительны, целесообразно пользоваться прозрачной клейкой полиэтиленовой пленкой. Затем пленку окрашивают гематоксилин-эозином и наклеивают на предметное стекло. Способ с использованием пленки особенно удобен при проведении экспертизы на месте происшествия или в случаях, когда наложения не видны, чтобы изъять их с целью изготовления мазка. Работать с пленкой удобно еще и потому, что наложения на ней располагаются в определенном участке и в относительно одной плоскости. Однако при исследовании с помощью клейкой пленки необходимо учесть, что вместе с другими наложениями на нее попадает и кровь, имеющаяся на поверхности травмировавшего орудия, в результате чего пленка теряет свою прозрачность, что мешает проведению исследований. Кроме того, кровь изменяет цвет текстильных волокон и меняет картину поляризации. Поэтому для растворения крови пленку прополаскивают в холодной дистиллированной воде.

После обнаружения в препаратах клеток и определения их тканевого происхождения устанавливают видовую и групповую принадлежность клеток. Все эти исследования проводятся в биологическом отделении специалистами.

Для обнаружения текстильных волокон одежды на орудии его осматривают как визуально, так и стереомикроскопически. Волокна обычно задерживаются на выступах, ребрах, в расщелинах орудия среди засохшей крови. Извлечение волокон производят с помощью смоченных в воде препаровальных игл, затем помещают их в дистиллированную воду. Для того чтобы растворить кровь, волокна несколько раз переносят в новые порции воды, а чтобы очистить их от жира, вместо воды используют спирт. Для изучения волокна помещают на предметные стекла, заключая в водный раствор глицерина. А. П. Загрядская (1975) предупреждает, что заключать волокна в полистирол или бальзам нельзя, так как они готовятся на ксилоле или толуоле, которые растворяют некоторые синтетические волокна. Затем готовят препараты из материалов поврежденной одежды, которые необходимы для сравнения. Мельчайшие кусочки тканей, взятые с разных участков вблизи повреждения, разволокняют под контролем стереомикроскопа на предметном стекле в капле дистиллированной воды и готовят препараты. Изучение препарата проводится с помощью биологического микроскопа, а сравнительная оценка — на микроскопе сравнения. При этом устанавливаются природа, цвет волокна, толщина, ширина его, особенности микроскопического строения. Для решения вопроса о сходстве и различии волокон, когда это не удалось сделать при обычном микроскопическом исследовании, применяется исследование свойств поляризации. Для некоторых волокон вид в поляризационном свете является характерным. Картина поляризации волокон одного и того же вида зависит от технологии производства, особенностей красителя. Некоторые данные для дифференцирования волокон можно получить также при сравнении свойств люминесценции сходных между собой по внешнему виду волокон. После проведения этих исследований могут быть применены пробы на сжигание, определение температуры плавления, прочность на разрыв, способность воспринимать определенные красители, спектральные, хроматографические и другие методы.

 

Используемая литература: Судебно-медицинская экспертиза повреждений

тупыми предметами: учеб. пособие / В. И. Акопов
под редакцией М. В. Калинкина - М.: Изд-во "Мудицина" 1978.

 

Скачать реферат: Laboratornye-metody-issledovaniya.rar

Пароль на архив: privetstudent.com

Категория: Рефераты / Медицина

Уважаемый посетитель, Вы зашли на сайт как незарегистрированный пользователь.
Мы рекомендуем Вам зарегистрироваться либо войти на сайт под своим именем.